戈升榮  袁靜  王平安
（上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬仁濟(jì)醫(yī)院臨床藥學(xué)藥理實(shí)驗(yàn)室，上海市   200001）

 

    沙棘（醋柳，Hippophae rhamnoides L.）是胡頹子科植物。我國(guó)的東北、華北 、西北和西南等地區(qū)是沙棘屬植物的主要分布區(qū)。它含有豐富的維生素、多種微量元素、多種氨基酸和脂肪酸以及黃酮類、三萜和甾體類化合物。沙棘果和葉中都含有黃酮類化合物，葉中的黃酮類化合物的總含量比果實(shí)中高。已被鑒定的黃酮類的化合物有：槲皮素、異鼠李素、山奈酚及其苷類、楊梅酮、綠原酸、豬草苷、兒茶酚和黃芪苷等。目前，從沙棘中提取的黃酮類化合物-醋柳黃酮已廣泛地應(yīng)用于臨床。本文就醋柳黃酮的提取分離含量測(cè)定方法以及臨床應(yīng)用情況做一綜述。

 

1 .醋柳黃酮的提取分離

    周長(zhǎng)風(fēng)^[1]根據(jù)鄰二羥基黃酮能與二價(jià)金屬離子形成沉淀的性質(zhì)，以鈣鹽沉淀法

    提取沙棘中黃酮成分，采用正交設(shè)計(jì)法對(duì)提取條件進(jìn)行了優(yōu)化。蔡定國(guó)等^[2]應(yīng)用高速逆流層析方法對(duì)醋柳總黃酮進(jìn)行分離，進(jìn)樣量為10mg，紫外280nm檢測(cè)，以CHCl₃-MeOH-H₂O(4:3:2,下相為流動(dòng)相)作溶劑系統(tǒng)，經(jīng)聚酰胺薄膜TLC鑒定，得到異鼠李素、山奈酚和蕓香苷等3個(gè)單色點(diǎn)成分以及1個(gè)以槲皮素為主的混合成分）。Yang-F等^[3]應(yīng)用多維逆流色譜系統(tǒng)從銀杏和沙棘中制備性的分離得到異鼠李素、山奈素和槲皮素純品。

 

2 .醋柳黃酮的含量測(cè)定

    目前，主要有比色法和高效液相色譜法。比色法是根據(jù)具有C₃和C₅位羥基或鄰二酚羥基的黃酮類化合物，能與三氯化鋁形成穩(wěn)定的呈色螯合物，在130nm左右有一最大吸收峰，從而可進(jìn)行紫外測(cè)定，黃酮苷類可以在酸性條件下回流水解成苷元，楊建瑜等^[4]據(jù)此以異鼠李素為對(duì)照品測(cè)得醋柳黃酮總苷元含量。田薇等^[5]根據(jù)黃酮類化合物與5%NaNO₂和10%Al(NO)₃反應(yīng)后的產(chǎn)物在1mol/LNaOH溶液中形成一紅色產(chǎn)物，510nm左右有一最大吸收峰，以蘆丁為對(duì)照品測(cè)得醋柳總黃酮的含量。付桂香等^[6]采用高效液相色譜法測(cè)定了沙棘葉中3種黃酮的含量，色譜柱為NovaparC₁₈柱，流動(dòng)相為甲醇-乙腈-水（40：15：45），0.1%的磷酸調(diào)_PH為3。定量方法為外標(biāo)法，提取溶劑為甲醇。

 

3 .醋柳黃酮的臨床應(yīng)用研究

3.1  冠心病心絞痛

    應(yīng)用醋柳黃酮片對(duì)101例冠心病心絞痛（瘀血癥）患者進(jìn)行了治療，臨床療效顯示^[7]：醋柳黃酮片能顯著降低心絞痛發(fā)作頻率和硝酸甘油日耗量，其總有效率為87.13%；改善心電圖有效率為53.85%；并能顯著降低血粘度。杜紹興等^[8]觀察了醋柳黃酮對(duì)冠心病患者左心功能的療效，發(fā)現(xiàn)治療后患者的臨床癥狀改善，明顯降低舒張壓。治療前、后應(yīng)用超聲心動(dòng)圖對(duì)左心功能的測(cè)定結(jié)果表明，左室周徑縮短率、左室每搏量、心排出量均有顯著改善。田慶印等^[9]用醋柳黃酮對(duì)36例冠心病患者進(jìn)行治療，以探討其作用機(jī)制。發(fā)現(xiàn)患者治療后的血漿氧化修飾低密度脂蛋白水平顯著降低，表明醋柳黃酮對(duì)冠心病的防治有重要作用。

3.2  缺血性心臟病

    用醋柳黃酮治療缺血性心臟病結(jié)果^[10]表明，治療有效率高達(dá)94%。心電圖改善率達(dá)54.8%，服藥后顯效時(shí)間較慢，但對(duì)臨床癥狀及心電圖的改善比較持久穩(wěn)定，因此推測(cè)該藥不完全是通過直接擴(kuò)張血管而發(fā)揮臨床療效。分析其機(jī)理，可能是通過防止血小板凝聚，降低毛細(xì)血管通透性和脆性，在維持微血管正常結(jié)構(gòu)及功能的情況下增加心肌抗氧能力，并促進(jìn)和改善心臟的側(cè)支循環(huán)。李衛(wèi)媛^[11]的研究也證實(shí)了上述結(jié)論。

3.3  心肌炎并發(fā)心功能不全

    分別用醋柳黃酮和地高辛（對(duì)照組）治療心肌炎并發(fā)心功能不全患者61例和52例。結(jié)果表明^[12]，醋柳黃酮片組顯效率及總有效率均明顯高于地高辛組。用醋柳黃酮2周后，每搏輸出量、每分輸出量、射血分?jǐn)?shù)、左室短經(jīng)縮短率均較治療前有顯著增加，提示醋柳黃酮確有良好的改善心功能的作用。分析其機(jī)理，可能與該藥抑制心肌ATP酶而顯示正性肌力效應(yīng)，促使心肌供血改善和外周血管的擴(kuò)張，使心臟后負(fù)荷減輕等因素有關(guān)。

3.4  高脂血癥和高粘血癥

    忻偉鈞等^[13]比較了醋柳黃酮和丹參治療高脂、高粘血癥病人的療效。方法為治療組35例用醋柳黃酮20mg，口服，1天3次；對(duì)照組用丹參10mg，口服，1天2次，療程均為6周，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，治療組血膽固醇、甘油三脂、載脂蛋白B100、血漿凝血因子、血液粘度、血小板聚集率和血栓指數(shù)均較治療前有顯著或極顯著下降。對(duì)照組在切變率為10s^-1時(shí)血液粘度較治療前有極顯著下降，在切變率為100s^-1 時(shí)血液濃度和血栓指數(shù)較治療前有顯著下降。表明醋柳黃酮治療后，大部分指標(biāo)（除10s^-1血液粘度指標(biāo)外）下降，效果優(yōu)于丹參。

3.5  對(duì)血流動(dòng)力學(xué)的影響

    采用雙盲法，用Admittance、STI法測(cè)定服藥前、后健康志愿者心功能及血流動(dòng)力學(xué)的變化，結(jié)果表明^[14]，口服醋柳黃酮10mg/次，能使正常人的排血前時(shí)間與左室排血時(shí)間的比值、等容收縮時(shí)間與左室排血時(shí)間的比值及等容收縮時(shí)間顯著縮�。幻坎�量顯著增加、每分輸出量、心臟指數(shù)、心肌收縮強(qiáng)度指數(shù)、心臟每搏作功指數(shù)等均有增加的趨勢(shì)；總外周阻力顯著降低，血管順應(yīng)度顯著增加。上述結(jié)果說明，醋柳黃酮能增強(qiáng)正常人心肌的收縮功能、泵功能，并且能降低外周阻力，增加血管彈性。吳英等^[15]以戊巴比妥鈉造成麻醉開胸犬心衰模型，靜脈注射沙棘總黃酮4.8mg/kg和9.7mg/kg，均可使心衰犬心輸出量、心臟指數(shù)、心室內(nèi)壓變化最大速率（+LVdP/dt_max）和左心室內(nèi)壓峰值明顯升高。注射9.7 mg/kg時(shí)，心室開始收縮的起點(diǎn)到心室內(nèi)壓最大變化速率的時(shí)間間隔明顯縮短；- LVdP/dt_max 明顯增加；T值、左室舒張末期壓明顯下降；總外周血管阻力和最大氧耗量明顯降低，，主動(dòng)脈平均動(dòng)脈壓和心率無明顯影響�？梢姡红o注沙棘總黃酮可明顯增強(qiáng)心衰犬的心臟泵功能和心肌收縮性能，并可明顯改善心肌舒張性能，降低外周血管阻力和心肌耗氧量，說明沙棘總黃酮有抗心衰的作用。

3.6 對(duì)血液流變學(xué)的影響

    人們?cè)谘芯看琢�黃酮片對(duì)血流變和血脂的影響中發(fā)現(xiàn)，服藥后患者的全血比粘度、血漿比粘度、血漿纖維蛋白原、紅細(xì)胞壓積的測(cè)定值均較測(cè)定前有極顯著的降低，提示醋柳黃酮片能增加紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，增加細(xì)胞間的排斥力，促使紅細(xì)胞解聚，使血液稀釋。說明該藥片有明顯的降低血漿纖維蛋白原的作用，從而降低血漿比粘度的功能^[16]。王秉文等^[17]用沙棘總黃酮4mg/（kg^.d）和20 mg/（kg^.d）給大鼠灌胃，連續(xù)16d，能顯著降低正常大鼠高切變率（200 s^-1）下的全血粘度；對(duì)紅細(xì)胞電泳時(shí)間、紅細(xì)胞比積、還原粘度及血沉均無顯著性影響；在切變率為100s^-1和200 s^-1時(shí)，沙棘總黃酮20 mg/（kg^.d）能顯著提高血漿粘度，在切變率為100s^-1時(shí)，沙棘總黃酮20mg/（kg^.d）能顯著降低全血比粘度。上述結(jié)果提示，降低全血粘度可能是其治療伴有血液流變學(xué)指標(biāo)異常心絞痛病人的機(jī)理之一。

3.7 對(duì)大鼠心肌再灌注損傷的保護(hù)作用

    吳英等^[18]觀察了沙棘總黃酮對(duì)大鼠心肌再灌注損傷時(shí)的超微結(jié)構(gòu)及對(duì)心肌組織超氧化歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量的影響。方法為預(yù)先肌肉注射沙棘總黃酮6d后，用SD大鼠制作心肌缺血再灌注模型。結(jié)果缺血40min，再灌注30 min后沙棘總黃酮能明顯減輕缺血再灌注損傷區(qū)超微結(jié)構(gòu)的病理改變，顯著提高大鼠心肌組織SOD活性并減少M(fèi)DA的生成，這種保護(hù)作用可能與提高自由基清除酶的活性及抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)有關(guān)。

3.8 對(duì)血管平滑肌的影響

    采用離體家兔胸主動(dòng)脈條標(biāo)本，觀察醋柳黃酮對(duì)KCl、CaCl₂和去甲腎上腺素誘發(fā)的血管平滑肌收縮的影響^[19]，發(fā)現(xiàn)沙棘總黃酮可明顯對(duì)抗KCl、CaCl₂和去甲腎上腺素對(duì)離體血管平滑肌的收縮反應(yīng)，使量效曲線右移；還可明顯抑制家兔主動(dòng)脈條Ca²⁺內(nèi)流依賴性收縮。上述結(jié)果表明，醋柳黃酮的血管擴(kuò)張作用可能與阻滯鈣通道有關(guān)。

 

    綜上所述，醋柳黃酮作為一種純中藥提取物，能改善缺血性心肌的血液循環(huán)，增加心肌的血流量，降低心肌的耗氧量，消除氧自由基，提高耐氧能力，并能促進(jìn)和改善心肌的側(cè)支循環(huán)；同時(shí)能降低血脂，防止血細(xì)胞凝聚，降低毛細(xì)血管的通透性和脆性。對(duì)治療和預(yù)防多種心血管疾病均安全、有效，無明顯毒副反應(yīng)，值得臨床進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

 

 

參考文獻(xiàn)：

[1]  周長(zhǎng)風(fēng).用正交設(shè)計(jì)法探討沙棘果中黃酮類化合物提取工藝[J]。內(nèi)蒙古藥學(xué)，1990，9（1）：5.

[2]  蔡定國(guó).應(yīng)用高速逆流層析分離沙棘總黃酮[J].中成藥，1991，13（6）：42

[3]  Yang F,Quan J,Zhang TY,et al.Multidimensional countercurrent chromatographic system and its application[J].J Chromatogr A,1998,803(1~2):298.

[4]  楊建瑜.沙棘果汁中總黃酮苷元的含量測(cè)定[J].西北藥學(xué)雜志，1989，（3）：31.

[5]  田 薇，陳朝暉，張喜民.分光光度法測(cè)定五味沙棘膠囊中總黃酮含量[J].西北藥學(xué)雜志，1998，13（3）：172.

[6]  付桂香，趙世萍，馮瑞芝，等.高效液相色譜法測(cè)定沙棘葉中黃酮含量[J].中國(guó)

中藥雜志，1997，22（5）：299.

[7]  張振賢，胡文文，顧仁樾.醋柳黃酮片治療冠心病心絞痛101例[J].遼寧中醫(yī)雜志，1997，24（6）：258.

[8]  杜紹興，徐南圖，沙立人，等.醋柳黃酮（沙棘酮）對(duì)冠心病左心功能的療效[J].北京醫(yī)學(xué)，1994，16（6）：37.

[9]  田慶印，潘其興，張業(yè)慶，等.醋柳黃酮治療冠心病的作用機(jī)制探討[J].山東醫(yī)學(xué)，1996，36（12）：14.

[10]  洪和秀，王文斌，文 秀，等.醋柳黃酮治療缺血性心臟病療效觀察[J].北京醫(yī)學(xué)，1994，16（6）：374.

[11]  李衛(wèi)媛.心達(dá)康治療缺血性心臟病的臨床觀察[J].臨床薈萃，1996，11（10）：474.

[12]  宿清和，安錫玲.醋柳黃酮片對(duì)心肌炎并發(fā)心功能不全的臨床研究[J].實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合雜志，1996，9（10）：611.

[13]  忻偉鈞，陳 萍，華福元，等.醋柳黃酮治療高脂血癥和高粘血癥[J].新藥與臨床，1997，16（1）：17.

[14]  王秉文，馮氧正，于佑民.沙棘總黃酮對(duì)正常人心功能及血流動(dòng)力學(xué)的影響[J].西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1993，14（2）：138.

[15]  吳 英，王 毅，王秉文，等.沙棘總黃酮對(duì)急性心衰犬心功能和血流動(dòng)力學(xué)的影響[J].中國(guó)中藥雜志，1997，22（7）：429.

[16]  卜祥雷，宋閩路，黃亞薇.醋柳黃酮片對(duì)血流變和血脂的影響[J].北京醫(yī)學(xué)，1994，16（6）：372.

[17]王秉文，成 華，袁秉祥，等.沙棘總黃酮對(duì)正常大鼠血液流變學(xué)的影響.西北藥學(xué)雜志，1993，8（2）：69.

[18]  吳 英，王秉文，王 毅，等.沙棘總黃酮對(duì)大鼠心肌再灌注損傷的保護(hù)作用[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，1997，13（1）：53.

[19]  于曉紅，劉傳鎬，李孝光，等.沙棘總黃酮對(duì)離體血管平滑肌的作用[J].西安醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，1990，11（4）：332.

 

                                       （收稿日期：1999  04-12   修回日期：1999  06-16）